根據(jù)國內(nèi)外現(xiàn)行的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定和推薦的檢驗方法，結(jié)合實際工作中的操作經(jīng)驗，針對Ⅱ級生物安全柜的，與防護(hù)性能相關(guān)的主要參數(shù)的現(xiàn)場儀器校準(zhǔn)測試要點總結(jié)如下。
 
      1、氣流流速
      體現(xiàn)防護(hù)功能有效的重要指標(biāo)，具體包括流入氣流與下降氣流兩項。流入氣流指通過安全柜隔離窗下方操作口，進(jìn)入前窗下側(cè)泄流槽的氣流，通過該氣流在操作口形成一道空氣屏障，為操作人員提供保護(hù)。下降氣流是指柜內(nèi)經(jīng)過高效過濾器凈化，工作區(qū)正上方向下流動的層流。儀器校準(zhǔn)測試方法為風(fēng)速計法或風(fēng)量儀法。風(fēng)速計法:將安全工作窗開啟至規(guī)定高度，隨后使用風(fēng)速儀在工作窗操作口平面上下兩排(距離上沿25%和下沿25%高度)測量流入氣流流速，最后由各點的測量值計算出平均值作為儀器校準(zhǔn)測試結(jié)果。下降氣流流速則在操作臺面依規(guī)布點，在定置點測量穿越該平面的下降氣流流速進(jìn)而計算平均值得到。一般在下降氣流流速測試時，測量點至少有3排且等距分布。風(fēng)量儀法:只針對流入氣流，具體方法在JJF1815-2020中有介紹，測量時須風(fēng)量儀與安全柜檢測口的密封必須可靠。相較于風(fēng)速計法，風(fēng)量儀法的優(yōu)勢在于可以避免儀器校準(zhǔn)測試點位的誤差引起的測量結(jié)果的偏差。
 
      兩個流速指標(biāo)體現(xiàn)了安全柜動力、管路系統(tǒng)的工作情況，不達(dá)標(biāo)時，需專業(yè)人員排查維修。B2型安全柜結(jié)構(gòu)復(fù)雜，附外部設(shè)備，維修較A1型復(fù)雜，需考慮房間送風(fēng)、回風(fēng)及壓力等參數(shù)，以及定置位置和外排管路布置等全局因素。
 
      2、高效過濾器完整性
      生物安全柜內(nèi)潔凈氣流以及確保排出氣流安全的重要耗材。高效過濾器完整性測試中，我國的JJF1815-2020、YY0569-2011與美國NSF/ANSI49:2018、歐盟的EN12469:2000均規(guī)定/推薦使用人工氣溶膠發(fā)霧配合掃描檢漏法，氣溶膠來源除EN12469:2000外均采用聚苯乙烯粒子。技術(shù)要求國內(nèi)外的表述基本一致。掃描檢漏使用氣溶膠光度計讀數(shù)，檢測前須卸去過濾器的散流板和保護(hù)蓋。多數(shù)品牌型號的安全柜預(yù)留了上游測試口，氣溶膠粒子與之直接連接，否則應(yīng)將發(fā)生粒子導(dǎo)入安全柜的入流位置。檢測時，氣溶膠光度計的鴨嘴形探頭與過濾器表面距離不大于25mm，以不超過50mm/s的速率進(jìn)行掃描，采用蛇形掃描路線防止漏掃，重點部位為過濾器與其他零部件之間的結(jié)合部、溝槽等。對于部分不具備掃描檢測條件的安全柜型，須在下游排氣的負(fù)壓管道上鉆孔，將光度計的探針插入孔中進(jìn)行下游濃度測試。掃描時遇到超限報警時，當(dāng)反復(fù)掃描確認(rèn)，排除包括振動在內(nèi)的干擾因素再判斷。不符合情況一般由于高效過濾器破損、結(jié)合處安裝不妥等原因造成。
 
      3、潔凈度
      與生物安全相關(guān)的重要指標(biāo)，Ⅱ級生物安全柜技術(shù)要求中，規(guī)定對進(jìn)入工作區(qū)和排出進(jìn)入實驗室環(huán)境的氣流均經(jīng)過高效過濾器的過濾并應(yīng)達(dá)到一定的潔凈度等級，也是直接反映對樣本保護(hù)機(jī)能的指標(biāo)，表征操作臺的潔凈環(huán)境等級。潔凈度的測試通常采用塵埃粒子計數(shù)器法。JJF1815-2020中規(guī)定對生物安全柜的潔凈度測試與生物潔凈室環(huán)境的測試大同小異，即在安全柜的工作臺面上，劃定采樣點:通常，邊界距離操作窗、側(cè)壁及后壁100mm以上，并按照梅花圖形布點5個以上;塵埃粒子計數(shù)器的采樣口至少高于臺面200mm，并在每個儀器校準(zhǔn)測試點進(jìn)行3次采樣。潔凈度超限多見于四個角落，特別是工作窗側(cè)的兩個角落。原因包括封邊松脫，角落氣流淤滯，以及工作窗口氣流受外界影響導(dǎo)致外界氣溶膠進(jìn)入工作區(qū)。
 
      4、氣流模式
      評價安全柜安全防護(hù)作用的可視化定性指標(biāo)。氣流模式檢測時，發(fā)生煙霧的技術(shù)方法無統(tǒng)一規(guī)定，可采用氣溶膠發(fā)生裝置、發(fā)煙筆等，對柜內(nèi)不同區(qū)域的氣流進(jìn)行示蹤，檢測人員。在對下降氣流流形進(jìn)行儀器校準(zhǔn)測試時，檢測員將煙源沿安全柜的操作臺面的中心線，在前操作窗開啟部分下沿的100mm以上的高度快速移動并觀察，氣流應(yīng)向下流動且無明顯的旋渦;測試觀察窗氣流時，須在操作窗開啟部分下沿150mm以上高度一線發(fā)煙并觀察，氣流應(yīng)向下流動且無明顯的旋渦，且柜內(nèi)的氣流不逸出到外界;在進(jìn)行操作口邊緣氣流測試時，在安全柜外貼著整個操作窗發(fā)煙并觀察，氣流應(yīng)向內(nèi)吸入泄流槽且不進(jìn)入操作區(qū)臺面;在滑動窗密閉性測試時，發(fā)煙位置在安全柜內(nèi)頂50mm處，氣流應(yīng)不溢出柜體。氣流模式不符合的原因往往是前述幾個方面合力造成，一般要結(jié)合各定量指標(biāo)綜合分析排查原因。
 
      5、測試參數(shù)間的相關(guān)性分析
      安全柜的計量參數(shù)共同反映其安全防護(hù)的有效性，研究人員發(fā)現(xiàn)，主要參數(shù)間的合格率存在一定相關(guān)性。表3統(tǒng)計了基于100臺Ⅱ級生物安全柜測試數(shù)據(jù)(71臺完全符合JJF1815-2020中技術(shù)要求，29臺有部分參數(shù)不符合)，總結(jié)了儀器校準(zhǔn)測試參數(shù)間的相關(guān)性結(jié)果。發(fā)現(xiàn):

      (1) 流入氣流流速與下降氣流流速存在一定的負(fù)相關(guān)性，這與內(nèi)循環(huán)風(fēng)機(jī)的比率設(shè)置相關(guān)。A級安全柜在風(fēng)機(jī)無故障的前提下，調(diào)教相對簡單。B級安全柜，入流風(fēng)速過高、下降氣流流速過低的伴生情況和嚴(yán)重程度比較多見，一方面，外排管路和風(fēng)機(jī)設(shè)置須合理配置，在負(fù)壓房時需考慮相對房間的送排風(fēng)，另一方面，兩者的平衡需通過氣閥的合理調(diào)整來實現(xiàn);
 
      (2) 氣流模式與潔凈度測試結(jié)果具有正相關(guān)性，當(dāng)入流和垂直氣流混亂時，往往會發(fā)生外界空氣流入操作臺面、特別是兩個靠近觀察窗的左右側(cè)角落的情況，此時也會伴隨發(fā)現(xiàn)下降氣流流速測量結(jié)果低于標(biāo)準(zhǔn)值，當(dāng)發(fā)現(xiàn)該類情況，表明安全柜對樣品的產(chǎn)品、交叉污染保護(hù)作用已經(jīng)失效;
 
      (3) 三項保護(hù)與氣流流速、氣流模式、潔凈度以及高效過濾器完整性均有正相關(guān)性，任意一到兩項參數(shù)不符合標(biāo)準(zhǔn)時，往往也會發(fā)現(xiàn)三項保護(hù)不在標(biāo)準(zhǔn)要求內(nèi)。這從側(cè)面也印證了生物安全柜保障的防護(hù)能力是系統(tǒng)性的，短板效應(yīng)顯著，因此使用、維護(hù)、儀器校準(zhǔn)時均需要相關(guān)人員全局考量。